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GFP是綠色螢光蛋白(Green Fluorescent Protein)的簡稱,由238個氨基酸殘基組成。GFP蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質,在藍色波長范圍的光線激發下,會發出綠色螢光。GFP或其突變體EGFP標簽系統等被廣泛用于基因表達效率的檢測,以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分布。我們都知道GFP抗體能應用于GFP的表達檢測、純化以及定位分析。那么該如何檢測GFP其他的一些突變體,如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表達和定位呢?
我們來看一下GFP標簽與其它突變體標簽的關系。YFP(Yellow Fluorescent Protein)是黃色熒光蛋白,其序列與GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代,這樣的GFP不發出綠色熒光,而發出較長波長的黃色熒光,也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了,在其他序列上沒有區別。而EGFP是增強型的GFP,發生了雙氨基酸取代,Leu(亮氨酸)取代GFP上的Phe64(苯丙氨酸),Thr(蘇氨酸)取代了GFP上的Ser65(絲氨酸),與GFP相比,具有更強更穩定的綠色熒光。CFP(Cyan Fluorescent Protein)與此類似,也是GFP第66位上的酪氨酸Tyr被色氨酸(Thr)所取代的結果,發藍色熒光。由此可見,GFP標簽與其它突變體GFP、YFP、EYFP、CFP的序列非常的類似,只有1-2個氨基酸殘基的變化。
由于EGFP、YFP、EYFP、CFP得N末端序列與GFP幾乎完全一致,因此從免疫原上來說,GFP與EGFP、YFP、EYFP、CFP沒有區別。
路陽GFP激發光源的典型用戶:
1.中國農業大學
2.北京農業大學
3.南京農業大學
4.中山大學
5.中國農業科學院果樹研究所
6.中國農業科學院水稻研究所
7.西北農林大學
8.華中農業大學
9.福建農林大學
10.山東農業大學。。。。。。
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